Sistema de imagem fluorescente GFP/Chl. fechado FluorCam

FluorCamOs sistemas de imagem de fluorescência GFP/Chl. fechados podem servir uma variedade de estudos moleculares e celulares aplicados às proteínas fluorescentes verdes. Uma roda de filtro totalmente controlada por software e acionada por eletricidade é instalada em um sistema de imagem de fluorescência fechado, juntamente com uma série de conjuntos de filtros para a detecção e imagem de GFP, EGFP, wtGFP, YFP, BFP ou outras proteínas fluorescentes e fluorescentes de banda.

O sistema de imagem de fluorescência GFP/Chl. fechado FluorCam também pode ser usado para detectar mudanças dinâmicas e distribuição espacial da fluorescência de clorofilo emitida pelas plantas, medir o processo do efeito Kautsky, extinção de fluorescência e outros processos de fluorescência temporária (transientes) e fornecer imagens de fluorescência 2D. A configuração de hardware especialmente concebida permite que o sistema se converta automaticamente em imagens de detecção de fluorescência de proteínas fluorescentes, fluorescência ou clorofila. O sistema é altamente integrado e permite a adaptação escura das amostras.

Áreas de aplicação:

• Detecção de fluorescência de proteínas fluorescentes e fluorescentes

• Transferência de genes e tecnologia de biosensores

• Pesquisa de plantas geneticamente modificadas

• Triagem de resistência a diferentes genótipos

• Estudo de interações vegetais-microbianas

• Estudo das interações vegetal-animal

· Propriedades da fotosíntese vegetal e triagem de distúrbios metabólicos

• Detecção de coerção biológica e não biológica

Estudos sobre resistência à coerção ou susceptibilidade das plantas

• Estudo de desigualdade dos poros

• Estudo do caos metabólico

• Avaliação de força e produção

Características:

· Fácil de operar, amostra de medição ajustável em altura, caixa de adaptação escura dedicada integrada para facilitar o tratamento e a operação da adaptação escura das plantas testadas, etc.

CCD de alta resolução com resolução de até 1392 x 1040 pixels para captura rápida e precisa de fluorescência de clorofilo e GFP

· Pode realizar medições de imagem repetidas automáticamente, pode configurar um programa experimental (Protocolos) medição de imagem circular automática, dados de medição de imagem são automaticamente depositados no computador por data e hora (com carimbo horário)

• Com vários procedimentos experimentais gerais (protocolos) como efeito de indução de Kautsky, análise de extinção de fluorescência, medição de mais de 50 parâmetros analíticos

· Opcional com módulo de imagem a cores TetraCam, com uma área máxima de imagem de 20 x 25 cm para medição de folhas ou análise de morfologia vegetal

amostra típica:

• Folhas, hastes, sementes, raizes, plantas inteiras.

• Tratamento de tecidos feridos, pequenas plantas em pratos de Petri

• Frutas e flores

• Bactérias azuis, algas verdes, bactérias

• Animais geneticamente modificados

Parâmetros técnicos:

• Parâmetros de medição: Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm'，Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII,NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP，QY, QY_Ln,Rfd, ETR Mais de 50 parâmetros de fluorescência de clorofila, cada parâmetro pode exibir imagens coloridas de fluorescência 2D

· Protocolo completo de medição automática para editar livremente o programa de medição automática

a) Fv / Fm: os parâmetros de medição incluem Fo, Fm, Fv, QY, etc.

b) Efeitos induzidos por Kautsky: Fo, Fp, Fv, Ft_Lss, QY, Rfd e outros parâmetros de fluorescência

c) Análise de extinção de fluorescência: Fo, Fm, Fp, Fs, Fv, QY, ΦII, NPQ, Qp, Rfd, qL e mais de 50 parâmetros

d) Curva de resposta à luz LC: Fo, Fm, QY, QY_Ln, ETR e outros parâmetros de fluorescência

e) Absorção PAR e NDVI (opcional)

f) A Dinâmica Reoxidativa (opcional)

g) Medição por imagem fluorescente estática, como GFP

h) Análise de dinâmica fluorescente rápida OJIP (opcional): Mo (inclinação inicial da curva OJIP), área fixa OJIP, Sm (medida da energia necessária para fechar todos os centros de reação fotográfica), QY, PI e outros 26 parâmetros

Sensor CCD TOMI-2 de alta resolução

a) Varredura progressiva de CCD

b) Resolução máxima da imagem: 1360 x 1024 pixels

c) Resolução temporal: até 20 quadros por segundo na resolução máxima da imagem

d) Resolução de conversão A/D: 16 bits (65.536 escalas de cinza)

e) Dimensão da imagem: 6,45 µm x 6,45 µm

f) Modo de operação: 1) Modo de vídeo dinâmico para medição de parâmetros de fluorescência de clorofila; 2) Modo instantâneo para medição de proteínas fluorescentes e corantes fluorescentes, como GFP

g) Modo de comunicação: Gigabit Ethernet

• Placa de fonte de luz: 4 grandes painéis de fonte de luz LED de alta intensidade, cada painel de fonte de luz é composto por uma matriz de 8 x 9 LEDs, a área eficaz da placa de fonte de luz é a mesma área de imagem 13 x 13 cm

• Luz de medição: 617nm vermelho padrão, outras bandas opcionais, duração ajustável de 10µs a 100µs

• 2 luz vermelha (617nm) + 2 luz azul (470nm), Actinic1 máxima intensidade de luz 300µmol (fotões) / m².s, Actinic2 máxima intensidade de luz 2000µmol (fotões) / m².s; A luz fotoquímica máxima pode ser atualizada para 3000 µmol (fotões) / m².s

• Flash saturado: intensidade máxima de luz 4000 µmol (fotões) / m².s, atualizável para 6000 µmol (fotões) / m².s

• Área de imagem: 13 x 13 cm, para análise de imagem de folhas de plantas, tecidos vegetais, algas, musgo, manto, plantas inteiras ou várias plantas, placas de 96 buracos, placas de 384 buracos, etc.

• Módulo de medição de GFP: roda de filtro de 7 bits e filtro específico para medição de GFP (proteína fluorescente verde)

• Módulo de medição de absorção PAR (opcional): Far Red 740nm (FAR), placa de LED bicolor 660nm e filtro especial para medição de absorção PAR e NDVI

• QA em análise de imagem de dinâmica oxidativa (opcional): medição de análise de dinâmica fluorescente STF com intensidade de luz STF de até 120.000 µmol (fotões) / m².s em 100 µs

• Módulo de dinâmica fluorescente rápida OJIP (opcional): resolução de tempo de até 1 µs para medir e analisar a curva OJIP com mais de vinte parâmetros relacionados, incluindo: Fo, Fj, Fi, P ou Fm, Vj, Vi, Mo, Área, Área fixa, Sm, Ss, N (número de rotações de redução de QA), Phi--_Po, Psi_o, Phi_Eo, Phi_Do, Phi_pav, ABS/RC (fluxo quântico de absorção de luz no centro de reação unitário), TRo/RC (fluxo quântico inicial de captura de luz no centro de reação unitário), ETo/RC (fluxo quântico de luz inicial de transmissão de elétrons no centro de reação unitário), DIo/RC (dispersão de energia no centro de reação unitário), ABS/CS (fluxo quântico de absorção de luz na seção de amostra unitária), TRo/CSo, RC/CSx (densidade do centro de reação), PIABS (índice de "desempenho" ou índice de sobrevivência baseado no fluxo quântico de absorção de luz), PIcs (índice de "desempenho" ou índice de sobrevivência baseado na seção)

• Placa de fonte de luz LED ultravioleta (opcional): 365nm ou 385nm, 1) Medição de fluorescência multicolorida (veja o sistema de imagem de fluorescência multiespectral FluorCam para detalhes); 2) Medição de wtGFP (proteína fluorescente verde de tipo selvagem), DAPI (4',6-dimetil-2-fenilpipe, um corante fluorescente)

• Placa de luz LED azul (opcional): 470nm, 1) medição de EGFP (proteína fluorescente verde reforçada); 2) Para a pesquisa da função do poro

• Placa de luz LED verde (opcional): 530nm, medição de YFP (proteína fluorescente amarela)

* A medição de proteínas fluorescentes ou corantes fluorescentes como wtGFP, DAPI, EGFP, YFP também requer filtros adequados

• Funcionalidades do software de análise de imagem fluorescente com clorofil FluorCam: com menus funcionais como Live (teste ao vivo), Protocols (personalização da seleção do programa experimental), Pre-processing (pré-processamento de imagem), Result (resultado da análise de imagem)

• Protocolos personalizados pelo cliente: tempo (por exemplo, duração da luz de medição, duração da luz fotoquímica, tempo de medição, etc.), intensidade da luz (por exemplo, intensidade da luz fotoquímica de diferentes qualidade de luz, intensidade do flash saturado, modulação da luz de medição, etc.), linguagem e script de programa de experimento dedicados, o usuário também pode criar novos programas de experimento livremente usando o modelo de assistente no menu Protocolo

• Funcionalidade de análise automática de medição: configuração de um protocolo para medição automática de imagem de ciclo sem vigilância, número de repetições e intervalo de tempo personalizado pelo cliente, dados de medição de imagem são automaticamente depositados no computador por data horária (com carimbo horário)

  Modo snapshot: o modo de imagem instantânea permite ajustar livremente a intensidade da luz, o tempo do obturador e a sensibilidade para obter imagens fluorescentes estáticas e instantâneas de amostras de plantas claramente destacadas

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• Pré-processamento de imagem: o software de programação reconhece automaticamente várias amostras de plantas ou áreas e seleciona manualmente a região de interesse (ROI). A forma da seleção manual pode ser quadrada, redonda, polígona arbitraria ou setorial. O software mede e analisa automaticamente as curvas dinâmicas fluorescentes e os parâmetros correspondentes para cada amostra e área selecionada, com um número ilimitado de amostras ou áreas (>1000)

• Modo de análise de dados: com o modo "recalculação do cálculo do sinal" (média aritmética) e o modo "recalculação da média do sinal", escolha o modo "recalculação do cálculo do sinal" em caso de alta relação de sinal e ruído, escolha o modo "recalculação da média do sinal" em caso de baixa relação de sinal e ruído para filtrar os erros causados ​​pelo ruído

• Resultados de saída: Diagrama de fluorescência de alta resolução em tempo, vídeo de mudança dinâmica de fluorescência, arquivo Excel de parâmetros de fluorescência, histograma, gráfico de imagem de parâmetros diferentes, lista de parâmetros de fluorescência com diferentes ROI e muito mais

• Largura de banda do detector CCD: 400-1000nm

· Sistema de iluminação: estático ou dinâmico (sinus)

Resposta espectral: eficiência quântica máxima (70%) em 540 nm e redução de 50% em 400 nm e 650 nm

Ruído de leitura: abaixo de 12eRMS, típico 10e

Capacidade total: mais de 70.000 e (unbinned)

Bios: firmware atualizável

· Método de comunicação: Gigabit Ethernet

Dimensões: 471 mm (L) × 473 mm (D) × 512 mm (H)

Peso: Aproximadamente 40 kg

Entrada de energia: Aproximadamente 1100 W

Tensão de alimentação: 90-240 V

Aplicações típicas:

O Instituto de Ciências da Vida de Xangai usou o FluorCam para medir a imagem de GFP obtida, na qual as plantas que emitem cores brilhantes são plantas que expressam GFP, e quanto mais sua cor é inclinada para vermelho, mais GFP é expresso.

Análise de imagem NDVI e GFP de contração-expansão de coral botão em diferentes fases (T1 = 0, T2 = 30, T3 = 60) (Miguel, 2014)

Origem: Europa